宿主环形RNA circCAMSAP2对猪丁型冠状病毒增殖的影响

摘要

旨在探究宿主环形RNA (circular RNA,circRNA)对猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)增殖的影响。从前期获得的PDCoV感染ST细胞的circRNA差异表达谱中筛选得到1个在PDCoV感染后表达水平下调的circRNA circCAMSAP2进行研究。利用Ensembl数据库在线分析和Sanger测序对circCAMSAP2的基因来源及接头序列进行验证；利用核质分离试验、RNase R水解试验对circCAMSAP2的分子特征进行鉴定；利用RT-qPCR对circCAMSAP2在PDCoV感染前后的差异表达水平进行验证；利用circCAMSAP2的过表达及敲低试验研究circCAMSAP2对PDCoV复制的影响。结果显示，circCAMSAP2是由CAMSAP2基因2号外显子经反向剪接而形成的circRNA分子，长度为260 nt,具有RNase R耐受性，主要定位于细胞质中。PDCoV感染抑制circCAMSAP2的表达。过表达circCAMSAP2可以抑制PDCoV的增殖，沉默circCAMSAP2可以促进PDCoV的增殖。结果表明，猪源circCAMSAP2负调控PDCoV的增殖，是设计抗PDCoV药物的潜在新靶点。

关键词

环形RNA / circCAMSAP2 / 猪丁型冠状病毒 / 病毒增殖