携带p57和BLID基因的重组减毒沙门菌诱导乳腺癌细胞凋亡

摘要

为构建携带p57和BLID基因的重组减毒沙门菌，并评价其对乳腺癌细胞的体外抑制作用及其对乳腺癌细胞凋亡的诱导作用，本研究构建了重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID,利用RT-PCR和Western blot检测重组减毒沙门菌在癌细胞中的转录与表达情况，CCK-8法评估重组减毒沙门菌安全性及对乳腺癌细胞活性的影响，细胞划痕试验分析重组减毒沙门菌对癌细胞的迁移力影响，流式细胞术和Western blot分析重组减毒沙门菌对MDA-MB-231细胞凋亡的作用。结果显示，PCR能扩增出重组减毒沙门菌携带的目的基因条带，且重组减毒沙门菌携带的目的基因可在MDA-MB-231细胞中转录和表达；重组减毒沙门菌的生长特性和遗传稳定性良好。与PBS组相比，重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID可极显著减弱(P<0.01)MDA-MB-231细胞的活性，并能极显著抑制(P<0.01)MDA-MB-231细胞的迁移。重组减毒沙门菌LH430/pEGFP-p57-BLID可明显增加MDA-MB-231细胞的凋亡数量，且能够极显著上调(P<0.01)促进凋亡蛋白Bax的表达，极显著下调(P<0.01)抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果表明，重组减毒沙门菌对乳腺癌细胞MDA-MB-231有抑制作用并能够诱导其发生凋亡，为后续开展体内抑瘤研究奠定基础。

关键词

p57基因 / BLID基因 / 减毒沙门菌 / 乳腺癌 / 凋亡