非洲猪瘟病毒p30抗体竞争化学发光法的建立

温升辉, 邵军军, 高闪电, 彭德财, 常惠芸, 丁嘉烽, 刘伟, 师铭咸

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.01.01

中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (01) : 1 -7. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.01.01

非洲猪瘟病毒p30抗体竞争化学发光法的建立

温升辉, 邵军军, 高闪电, 彭德财, 常惠芸, 丁嘉烽, 刘伟, 师铭咸

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摘要

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染引起猪的一种急性、热性、高致死性疾病。鉴于当前尚缺乏商业化的疫苗，并且近年来ASFV不断演变，中等毒力基因Ⅱ型毒株的涌现以及基因Ⅰ型弱毒株的传入，导致猪仅出现了持续性和慢性感染的状况。因此，对ASFV的特异性抗体检测变得势在必行。本研究利用p30单克隆抗体建立了一种检测ASFV p30抗体的竞争化学发光法——p30-cCLIA。通过检测背景清晰的阴阳性血清，确定该方法的Cut-off值为50%时，诊断敏感性(Dsn)和诊断特异性(Dsp)均为100%。在最佳反应条件下筛选出适用于p30单抗16-5E7E8-HRP的酶标稳定剂。此外，本研究建立的p30-cCLIA方法的灵敏度比商品化阻断ELISA试剂盒更高(1∶2 048 vs 1∶512),并具有良好的重复性。通过检测其他病毒感染猪阳性血清，结果表明与这些血清无交叉反应性。该方法的建立为ASF早期诊断提供了有力工具。