犬弓首蛔虫超氧化物歧化酶的免疫保护性分析

摘要

为探究犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)对小鼠的免疫保护效果，选取75只6周龄昆明系小鼠随机分为5组进行免疫保护试验，分别于试验0、14、28 d对每只小鼠皮下注射50、75和125 mg/L的Tc-SOD 0.1 mL,空白组不做任何处理，PBS组注射等量的无菌PBS。共免疫3次，每次免疫间隔14 d;第3次免疫后14 d,经口感染3 000个/只感染性虫卵。在每次免疫前、第3次免疫后14 d和攻虫后7 d对小鼠尾静脉采血并分离血清，采用间接ELISA法检测血清中特异性IgG抗体；通过CCK-8和qRT-PCR法分析小鼠脾淋巴细胞的增殖能力及Th1(IFN-γ,IL-2)和Th2 (IL-4,IL-10)型细胞因子mRNA的表达水平；计算攻虫后7 d的幼虫减虫率并采用苏木精-伊红(H&E)染色观察肝脏和肺脏的病理变化。结果显示，与PBS组相比，Tc-SOD免疫组小鼠血清IgG抗体水平随着免疫次数的增加和时间延长而升高，攻虫感染后仍维持在较高水平，差异极显著(P<0.001)。三免后14 d, IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的mRNA表达水平均极显著增高(P<0.01),其中IL-4和IL-10显著高于IFN-γ和IL-2(P<0.05),表现为Th2型为主的免疫反应。小鼠脾淋巴细胞的增殖能力显著增强(P<0.01)。50、75和125 mg/L的Tc-SOD免疫组的幼虫减虫率分别为18.7%、24.9%、37.6%,其中125 mg/L Tc-SOD组差异显著(P<0.05),具有较好的免疫保护效果。H&E染色结果显示，3个Tc-SOD免疫组均缓解了小鼠肝脏和肺脏的炎性细胞浸润(中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨噬细胞)和出血性病变。上述研究结果表明，Tc-SOD可诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答，以Th2型免疫反应为主，并对T.canis的感染具有一定程度的免疫保护作用。

关键词

小鼠 / 犬弓首蛔虫 / 超氧化物歧化酶 / 免疫应答