辅酶Q10通过自噬调控双酚A诱导的TM3细胞凋亡

杨文哲; 赵彤; 潘飞龙; 王锦浩; 陈芳芳; 邵雯琪; 王诗睿; 赵树臣; 刘克祥; 赵立佳

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.01.13

中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (01) : 91 -99. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.01.13

辅酶Q10通过自噬调控双酚A诱导的TM3细胞凋亡

杨文哲, 赵彤, 潘飞龙, 王锦浩, 陈芳芳, 邵雯琪, 王诗睿, 赵树臣, 刘克祥, 赵立佳

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摘要

旨在探讨膳食补充剂辅酶Q10(CoQ10)是否通过自噬途径缓解双酚A(BPA)暴露诱导的小鼠睾丸间质细胞株(TM3)损伤。利用不同浓度的BPA处理TM3细胞24 h后，采用CCK8法检测细胞活力。随后，将TM3细胞分为5组，分别为CON组、BPA组、Torin2组、CQ组和BPA+CoQ10组，每组设有3个重复。使用倒置光学显微镜观察TM3细胞的状态。通过Western blot检测各组中p62和LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的相对表达水平，利用MDC细胞自噬染色法检测TM3细胞自噬水平，RT-qPCR检测Atg7、Beclin1、p62和Atg5基因的mRNA表达水平，流式细胞仪检测TM3细胞的凋亡率。结果显示，与0μmol/L BPA处理组相比，60μmol/L BPA处理24 h后，TM3细胞活力极显著下降(P<0.01)。与CON组相比，BPA处理组TM3细胞数量明显减少；自噬相关蛋白(p62、LC3-Ⅱ)的表达量极显著升高(P<0.01),与CQ组相当；MDC荧光强度极显著增强(P<0.01);自噬相关基因(Atg7、Beclin1、p62、Atg5)的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。与BPA组相比，BPA+CoQ10处理组TM3细胞自噬相关基因Atg7和Beclin1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),p62和Atg5 mRNA表达水平极显著降低(P<0.01);自噬相关蛋白p62的表达量极显著下降(P<0.01),LC3-Ⅱ的表达量显著降低(P<0.05);MDC荧光强度显著下降(P<0.05);细胞凋亡率极显著下降低(P<0.01)。结果表明，CoQ10可通过改善BPA引起的TM3细胞自噬通量异常，从而减少细胞凋亡。