PRV感染小鼠三叉神经节细胞后通过RIG-Ⅰ信号通路调控Ⅰ型干扰素分泌

摘要

为探究伪狂犬病病毒（pseudorabies virus, PRV）感染小鼠三叉神经节（TG）细胞后对其抗病毒免疫信号通路及Ⅰ型干扰素因子（IFN-Ⅰ）的影响。本试验使用1 MOI PRV接种感染TG原代细胞，使用10^6.29 TCID₅₀ PRV滴鼻感染小鼠，使用实时荧光定量PCR（qPCR）、Western blot和ELISA等技术检测小鼠TG原代细胞不同攻毒时间点及体内攻毒组和对照组的基因转录、蛋白表达及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示，PRV感染小鼠TG原代细胞后引起RIG-I、MAVS和IRF3的基因及蛋白表达变化，诱导了体内外IRF3和IκBα的磷酸化。ELISA结果显示，PRV感染后可调控小鼠TG原代细胞及小鼠TG内IFN-α和IFN-β的分泌。使用siRNA干扰TG细胞内RIG-Ⅰ表达后Western blot检测RIG-Ⅰ信号通路相关蛋白表达结果及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示，siRIG-Ⅰ成功干扰TG细胞内RIG-Ⅰ蛋白表达，并引起下游MAVS和IRF3等蛋白表达发生变化，同时调控TG细胞内IFN-α和IFN-β的分泌。研究结果表明，PRV感染可诱导小鼠TG原代细胞及小鼠TG内RIG-Ⅰ的表达，并通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号轴调控TG细胞内IFN-Ⅰ的抗病毒免疫反应，以及PRV会抑制TG内IRF3表达，并在感染后期显著上调IFN-β的表达，这可能是PRV在感染后期导致小鼠快速死亡的重要原因。本试验揭示了PRV感染小鼠TG细胞后通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号通路调控IFN-Ⅰ的部分抗病毒免疫机制，以及发现IRF3蛋白在体内外不同的变化趋势，为后续深入研究奠定了基础。

关键词

PRV / RIG-Ⅰ / IRF3 / 信号通路 / Ⅰ型干扰素 / 小鼠