犬细粒棘球绦虫粪抗原诊断标志物筛选

班万里; 刘帅; 王冰洁; 吾力江·卡马力; 潘星羽; 王延; 古丽扎提·塔力甫汗; 徐晶; 穆尼拉·特列吾汗; 张壮志; 赵莉

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.04.13

中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (04) : 717 -723. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.04.13

犬细粒棘球绦虫粪抗原诊断标志物筛选

班万里, 刘帅, 王冰洁, 吾力江·卡马力, 潘星羽, 王延, 古丽扎提·塔力甫汗, 徐晶, 穆尼拉·特列吾汗, 张壮志, 赵莉

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摘要

旨在筛选特异性强、敏感性高的犬细粒棘球绦虫(Eg)粪抗原诊断标志物。采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴人工感染犬,制备犬Eg阴性粪样和阳性粪样。盐析结合亲和层析纯化获得多克隆抗体、阴性粪抗原-多克隆抗体结合物和阳性粪抗原-多克隆抗体结合物,ELISA和Western blot检测3组样品,对3组样品进行LC-MS/MS检测和生物信息学分析,以阳性粪抗原-多克隆抗体结合物为处理组,多克隆抗体和阴性粪抗原-多克隆抗体结合物为对照组筛选处理组独有的唯一肽段。ELISA和Western blot检测显示仅阳性粪抗原-多克隆抗体结合物为阳性。根据LCMS/MS检测和生物信息学分析,共鉴定到171个蛋白,486条肽段;蛋白质定量分析筛选出86个差异蛋白;根据唯一多肽筛选出仅处理组存在唯一肽段蛋白的蛋白质11个,其中3个蛋白质与细粒棘球绦虫相关,分别为Dysferlin、Integrator complex 9和Diagnostic antigen gp50,此3个蛋白质分别为膜相关蛋白、INT复合体组成部分和诊断抗原。本研究初步筛选出3个候选犬Eg粪抗原诊断标志物,对进一步挖掘Eg诊断标准物质、筛选包虫病靶标基因和疫苗研制提供参考。