弓形虫tRNA硫化修饰酶TgMnmA基因缺失虫株的免疫保护性研究

摘要

为了评估弓形虫tR NA硫化修饰酶TgMnmA基因缺失虫株对ICR小鼠的免疫原性和免疫保护效果,本研究构建了RHΔMnmA免疫的小鼠模型,通过腹腔注射10个RHΔMnmA速殖子对小鼠进行免疫,30 d后利用间接ELISA技术检测免疫后小鼠的特异性IgG抗体及其亚型,制备脾淋巴细胞悬液,利用流式细胞术分析脾淋巴细胞亚群,并通过实时荧光定量PCR技术检测各细胞因子mRNA的相对表达水平;对免疫30 d后的小鼠腹腔接种RHΔku80速殖子,5 d后检测小鼠腹水、心脏、肝脏和脑的荷虫量,观察并记录小鼠感染后30 d内的存活情况。结果表明,与对照PBS组相比,RHΔMnmA免疫组产生了更高的IgG和IgG2a抗体水平,细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA相对表达水平都有不同程度的上升,小鼠脾淋巴细胞CD4⁺和CD8a⁺的数量也显著增加;同时,对于RHΔku80虫株的攻击,免疫组能够有效降低小鼠腹水和部分脏器的荷虫量,抑制虫体的体内繁殖,并显著提高小鼠的生存率。本研究结果显示,弓形虫TgMnmA基因缺失虫株能够诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答,并且针对RHΔku80虫株的感染提供良好的免疫保护,有成为候选抗弓形虫减毒活疫苗的潜力。

关键词

弓形虫疫苗 / 硫化修饰酶 / TgMnmA / 免疫保护