1株多源曼氏杆菌TbpB定点突变与免疫原性

摘要

多源曼氏杆菌（Mannheimia varigena,M.varigena）是引起牛呼吸道疾病的重要病原体。转铁结合蛋白B（transferrin binding protein B,TbpB）是一种直接暴露于细胞外膜的脂蛋白，不仅参与细菌铁离子代谢，还是一种重要的毒力因子。为探究M.varigena的TbpB与牛转铁蛋白（bovine transferrin, bTf）结合关键氨基酸残基突变对其免疫原性的影响，本研究对1株牛源M.varigena进行全基因组测序，预测其铁吸收通路，并通过生物信息学分析预测M.varigena TbpB与bTf结合的关键氨基酸残基，构建了2个M.varigena TbpB突变体：Mv-TbpB^Y205A和Mv-TbpB^Y258A,通过点阵杂交试验和小鼠动物试验分别评估其与bTf的结合活性和免疫原性。结果显示，Mv-TbpB^Y258A突变导致其失去与bTf的结合能力，而Mv-TbpB^Y205A突变对其与bTf的结合能力几乎没有影响，小鼠免疫试验表明，与野生型TbpB相比，突变体诱导产生了更高水平的特异性抗体；且在攻毒试验中，接种突变型TbpB的小鼠表现出更高的存活率。结果表明，通过定点突变可以增强TbpB的免疫原性，为开发针对M.varigena的新型亚单位疫苗提供了理论依据。

关键词

多源曼氏杆菌 / 转铁结合蛋白B / 牛转铁蛋白 / 定点突变 / 免疫原性