脑心肌炎病毒样颗粒疫苗的制备及免疫保护效果评价

摘要

脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭载体中，构建重组杆状病毒Ac-P12A-3C,并大量表达和纯化了EMCV病毒样颗粒(EMCV-VLPs),透射电镜观察显示，EMCV-VLPs能正确组装约30 nm的病毒样颗粒。小鼠免疫和攻毒试验表明，该病毒样颗粒免疫可有效抵抗EMCV的攻击，保护率高达100%。组织病理切片结果显示，与PBS攻毒组相比，VLP免疫组的组织病理损伤显著减轻，且组织中的病毒载量也明显降低。仔猪免疫试验结果显示，该病毒样颗粒可以诱导仔猪产生良好的体液免疫反应，二免后中和抗体滴度可达1∶320～1∶640,且免疫过程中未观察到明显的副反应。本研究初步验证了病毒样颗粒疫苗的免疫原性和安全性，为研制基于EMCV-VLPs的亚单位疫苗奠定了基础，并为脑心肌炎的防控提供了新的策略。

关键词

脑心肌炎病毒(EMCV) / 病毒样颗粒(VLPs) / 免疫原性 / 体液免疫 / 杆状病毒-昆虫细胞表达系统 / 中和抗体 / 亚单位疫苗