miR-146a壳聚糖纳米粒的制备及其对LPS诱导的急性肝细胞损伤的保护作用

摘要

旨在探讨壳聚糖负载miR-146a纳米颗粒的性能及其在LPS诱导的体外急性肝损伤中的保护作用。用离子交联法制备了半乳糖化精氨酸壳聚糖(GCA)纳米颗粒，并进一步制备了不同质量比的GCA-miR-146a纳米颗粒。通过凝胶阻滞试验分析GCA纳米颗粒对miR-146a的结合效率。使用透射电子显微镜和纳米粒径测量仪对其粒径、形态和电位进行分析。利用CCK-8法检测GCA纳米颗粒对HepG2细胞的细胞毒性。通过荧光显微镜观察细胞对纳米颗粒的摄取，并筛选出最佳比例以进行后续研究。实时荧光定量PCR评估miR-146a在脂多糖(LPS)诱导的体外急性肝损伤中的保护效果。结果显示，当GCA-miR-146a的质量比为5∶1时，获得的纳米颗粒形态均一，粒径约为100 nm,表面电荷为1.15 mV,包封率和载药量分别为97.11%和20.08%。结果表明，GCA-miR-146a纳米颗粒对HepG2细胞无细胞毒性，且具有较高的转染效率。体外试验结果显示，GCA-miR-146a纳米颗粒能够显著提高HepG2细胞中miR-146a的表达，同时显著抑制IL-6和TNF-α的mRNA表达水平。本研究制备的GCA纳米颗粒对miR-146a具有高负载能力，能够有效保护LPS诱导的HepG2急性肝细胞损伤。

关键词

壳聚糖 / 半乳糖 / 精氨酸 / miR-146a / 急性肝细胞损伤