VD₃对低钙血症奶牛中性粒细胞钙吸收和LC3自噬功能的影响

摘要

为研究VD₃影响亚临床低钙血症奶牛中性粒细胞内Ca²⁺浓度对LC3自噬作用的影响，采集奶牛外周血分离提取中性粒细胞；Western blot技术对细胞LC3自噬途径相关蛋白（LC3-Ⅱ、P62、ATG5）丰度检测；通过流式细胞术检测中性粒细胞胞内Ca²⁺浓度水平；利用激光共聚焦技术检测细胞LC3自噬体。通过添加VD₃作用影响细胞内Ca²⁺浓度水平，探究VD₃促进细胞钙吸收影响LC3自噬功能。Western blot检测显示亚临床低钙血症奶牛中性粒细胞LC3、ATG5蛋白丰度下降，P62蛋白丰度上升，结果表明，亚低钙血症奶牛LC3自噬功能减弱。VD₃处理后，流式细胞术结果显示VD₃促进中性粒细胞内Ca²⁺浓度水平上升。Western blot结果显示，健康奶牛和亚临床低钙血症奶牛中性粒细胞在VD₃作用下LC3自噬功能增强，说明VD₃促进中性粒细胞内Ca²⁺浓度水平继而影响LC3自噬功能。

关键词

Ca²⁺ / 中性粒细胞 / 亚临床低血钙症 / LC3 / VD₃