基于单抗的A型塞内卡病毒抗体竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立

摘要

为了建立了一种快速定量检测A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体的竞争化学发光酶联免疫检测方法(chemiluminescent enzymee-linked immunoassay, CLEIA),在聚苯乙烯板中包被灭活SVA抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗SVA VP2、VP3蛋白单克隆抗体作为血清样本中抗体的竞争酶标抗体，以阳性血清稀释制备的校准品绘制标准曲线实现定量检测，成功建立的SVA竞争CLEIA在45 min内即可完成检测，可检测到最大稀释倍数为1∶2 048的校准品溯源血清，与口蹄疫等其他5种病毒抗原的标准阳性血清无交叉反应；批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,重复性和稳定性较好；与中和试验分别检测480份临床血清，阳、阴性符合率分别为95.30%、97.57%,总符合率为96.88%,具有高度的一致性。结果表明，建立的SVA竞争CLEIA检测方法可以用于SVA抗体的快速定量检测。

关键词

A型塞内卡病毒 / VP2 / VP3 / 竞争化学发光酶联免疫 / 定量

基金资助

2022年度河南省重大科技专项资助项目(221100110600); 2023年度河南省重点研发专项资助项目(231111111300); 2023年度河南省科技攻关计划资助项目(232102111053,232102110085,232102110089); 河南省现代农业产业技术体系课题资助项目(豫财科[2020]92号)