山楂叶总黄酮对大鼠肠上皮细胞抗炎抗凋亡作用效果及机制

摘要

旨在探讨山楂叶总黄酮(total flavonoids of hawthorn leaves, TFHL)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的大鼠肠上皮细胞(intestinal epithelial cell 6,IEC-6)炎性损伤的抗炎、抗凋亡作用效果及机制。本研究首先采用LPS处理IEC-6细胞以构建体外炎症模型。然后用3种浓度的TFHL孵育IEC-6细胞24 h后，用LPS处理细胞24 h,并采用RT-qPCR技术检测炎症基因COX-2、iNOS的mRNA水平，Western blot检测凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Bcl-2和JNK/p-JNK蛋白水平；进一步采用TFHL、SP600125预处理细胞24 h后加入LPS处理细胞24 h,考察TFHL与SP600125对LPS诱导下IEC-6细胞炎症因子及凋亡蛋白水平的影响。结果显示，与LPS组相比，2.5、5.0、10.0 mg/L TFHL组COX-2、iNOS的mRNA水平和Bax、Caspase-3蛋白水平均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白水平极显著上升(P<0.01),p-JNK蛋白水平和p-JNK/JNK比值均极显著下降(P<0.01);与LPS组相比，TFHL+LPS组的COX-2、iNOS mRNA水平均极显著下降(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白水平均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白水平显著上升(P<0.05);与LPS组相比，TFHL+SP600125组的COX-2、iNOS mRNA水平均极显著下降(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白水平均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白水平极显著上升(P<0.01)。结果表明，TFHL通过抑制JNK信号通路从而对LPS诱导的IEC-6细胞发挥抗炎、抗凋亡的作用。

关键词

山楂叶总黄酮 / 炎性损伤 / LPS / JNK信号通路 / 大鼠