含有FAdV-4 Fiber 2 B细胞表位的IBV S1融合蛋白的表达及免疫原性

摘要

为验证禽腺病毒4(FAdV-4) WZ株Fiber 2 B细胞表位Pep1和Pep4可作为多价表位疫苗的候选表位，将表位与鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白基因以不同模式进行串联，构建重组融合质粒，并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。经Western blot和ELISA试验证实，表达获得的4个融合蛋白均能特异性地与抗M41全病毒血清和WZ株抗Fiber 2-knob蛋白血清发生反应。纯化后免疫BALB/c小鼠，在小鼠血清中可检测出抗肽表位的特异性抗体，其中Pep4表位比Pep1表位能诱导更强的免疫反应。当Pep1分别连接在融合蛋白的氨基端和羧基端时，均能使免疫动物产生相同水平的抗Pep1抗体，而将Pep4连接在融合蛋白羧基端时，免疫动物产生的抗Pep4特异性抗体水平更高。结果表明，具有反应原性的WZ株Fiber 2的B细胞表位Pep1和Pep4在与蛋白偶联时形成的融合蛋白可以使Pep1和Pep4获得免疫原性，且不影响载体蛋白的抗原性，这为FAdV-4多价表位疫苗的设计和研发提供了技术支撑和参考依据。

关键词

B细胞表位 / FAdV-4 / Fiber 2 / 传染性支气管炎 / 融合蛋白