赶黄草提取物缓解断奶仔猪腹泻的作用及机制

摘要

旨在观察赶黄草提取物(penthorum chinense pursh,PCP)对断奶仔猪腹泻的影响,并通过网络药理学和体内动物试验对其机理进行探讨。动物试验1将160只1日龄的仔猪随机分为对照组、预防低剂量组(0.25%)、预防中剂量组(0.50%)、预防高剂量组(1.00%),试验周期62 d。从第14天开始,在3个预防组基础日粮中分别添加0.25%、0.50%、1.00%PCP并断奶,在第29天停止添加PCP,连续观察35 d并记录仔猪腹泻率。动物试验2将35只4周龄雄性昆明小鼠,随机分为5组(Control组、脂多糖(LPS)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),试验周期8 d。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别连续7 d灌胃200、400、800 mg/kg PCP,Control组和LPS组灌胃等量的无菌生理盐水。在试验第8天,除Control组腹腔注射无菌生理盐水外,其余组腹腔注射等量的LPS (15 mg/kg)建立肠道损伤模型。采用HE染色进行回肠组织病理学观察,荧光定量PCR检测炎症因子及紧密连接蛋白mRNA的表达水平。运用TCMSP数据库筛选PCP活性成分及靶点,并使用GeneCards数据库得到腹泻的靶点。将PCP与腹泻的靶点导入联川生物云平台,取交集后获取韦恩图,结合Cytoscape 3.7.1和STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,通过KOBAS-i平台进行GO和KEGG富集分析。结果表明,与对照组相比,在28～62 d,预防低剂量组(0.25%)、预防中剂量组(0.50%)、预防高剂量组(1.00%)断奶仔猪腹泻率显著降低(P<0.05)。根据网络药理学预测,PCP潜在成分145种对应靶点32个,腹泻6 332个靶点,交集靶点118个。PCP治疗腹泻的保护机制可能与NF-κB、P13k-Akt信号通路有关。进一步的试验证实,与LPS组相比,PCP能显著改善小鼠回肠病理状态,回调肠紧密连接蛋白Occludin(P<0.05)的mRNA表达水平;同时PCP也能显著下调NF-κB的mRNA水平。结果显示:PCP可能通过多靶点、多通路缓解仔猪腹泻,主要机制可能与抑制Akt-NF-κB信号通路有关,本研究为PCP的临床应用提供了理论依据。

关键词

肠道屏障 / 断奶仔猪 / 赶黄草提取物 / LPS / 腹泻