宿主蛋白RBM8A对猪伪狂犬病病毒复制的作用

摘要

RNA结合基序蛋白8A(RNA binding motif protein 8A,RBM8A)是一种RNA结合蛋白，主要参与翻译、细胞周期调控等。此外RBM8A还是外显子连接复合体(exon-junction complex, EJC)的核心因子，在细胞中大量表达尤其是在癌症细胞中异常表达并存在于细胞质和细胞核。研究表明RBM8A在某些病毒复制过程中起关键调控作用如黄病毒科病毒，RBM8A是否参与猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)的复制尚未见报道，为探究RBM8A蛋白对PRV复制的影响，设计并构建真核表达质粒pCAGGS-HA-RBM8A,并同时构建sh-RBM8A,通过过表达和抑制RBM8A、qRT-PCR、Western blot检测RBM8A对PRV复制的影响，同时构建PRV-gB标准质粒绘制PRV增殖标准曲线，过表达和抑制RBM8A后，提取DNA,通过qRT-PCR计算病毒拷贝数，进一步检测RBM8A对PRV复制的影响。结果显示，过表达RBM8A能够抑制PRV的复制，同时降低病毒拷贝数，过表达shRBM8A促进PRV的复制，同时提高病毒拷贝数。结果表明，RBM8A蛋白具有抑制PRV复制的作用，本研究为RBM8A的功能挖掘提供参考，为探索抗PRV复制机制奠定了基础。

关键词

RBM8A / 猪伪狂犬病病毒 / 抗病毒 / 复制 / 增殖曲线