奶牛源链球菌对庆大霉素异质性耐药菌株的筛选鉴定及其耐药机制探究

摘要

探究奶牛源链球菌庆大霉素异质性耐药的流行情况及可能机制。收集奶牛源生乳中分离的39株链球菌，通过微量肉汤稀释法测定庆大霉素等药物对分离菌的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）,采用K-B纸片扩散法、菌落谱型分析（population analysis profile, PAP）以及耐药稳定性试验探究链球菌的异质性耐药特征，基于全基因组测序和重测序分析异质性耐药产生的机制。结果显示，K-B纸片扩散法筛出7株疑似异质性耐药菌株，占比17.95%（7/39）。PAP分析显示，3株链球菌L147、L108和L174异质性耐药菌株的MIC与最高非抑菌浓度（maximum noninhibitory concentration, MNIC）比值大于8,且耐药亚群的发生频率范围为1.38×10^-5～8.18×10^-5,大于1×10^-7,确证为庆大霉素异质性耐药菌株。耐药稳定性试验结果显示，3株链球菌的耐药亚群均不能稳定遗传。全基因组测序结果显示，与参考基因组相比氨基糖苷类抗生素的核糖体靶基因rsmA、rsmB和rsmE存在基因突变，这可能导致链球菌对庆大霉素产生异质性耐药。结果表明，奶牛源中链球菌对庆大霉素发生异质性耐药的现象较高，因此在使用庆大霉素进行临床治疗时应更加注意异质性耐药的发生。

关键词

链球菌 / 庆大霉素 / 菌落谱型分析 / 异质性耐药 / 全基因组测序