TGR5对脂肪肝奶牛肝脏脂质代谢及胆汁酸合成的影响

摘要

旨在探究TGR5对脂肪肝奶牛肝脏脂质代谢和胆汁酸合成的影响。通过穿刺技术采集健康奶牛与脂肪肝奶牛肝脏组织，利用Western blot和荧光定量PCR检测脂质合成相关因子ACC1、FAS、SREBF1和脂质氧化因子CPT1A以及胆汁酸合成相关因子CYP8B1、CYP7B1、CYP27A1的蛋白及mRNA的表达情况，以及CYP7B1的mRNA水平。分离1日龄犊牛原代肝细胞于体外培养，设置4个处理组即Control、NEFA、INT-777、INT-777+NEFA组。其中NEFA组浓度为1.2 mmol/L, INT-777组浓度为1μmol/L,INT-777+NEFA组同时添加1.2 mmol/L NEFA和1μmol/L INT-777。刺激12 h后收集细胞，用Western blot和荧光定量PCR检测ACC1、FAS、SREBF1、CPT1A、CYP8B1、CYP7A1、CYP27A1的蛋白和mRNA水平以及CYP7B1的mRNA水平，并通过流式细胞术和试剂盒分别检测细胞中脂滴含量和TG含量。结果显示，与健康奶牛相比，脂肪肝奶牛肝组织中ACC1、FAS、SREBF1、CYP8B1、CYP7A1的蛋白及mRNA的表达上调，CPT1A、CYP27A1、TGR5的蛋白水平、mRNA水平和CYP7B1的mRNA水平下调。在体外试验中，相比于Control组，NEFA组中ACC1、FAS、SREBF1、CYP8B1、CYP7A1的蛋白及mRNA水平上调，CPT1A、CYP27A1、TGR5的蛋白与mRNA水平及CYP7B1的mRNA水平下调；与NEFA组相比，INT-777+NEFA组ACC1、FAS、SREBF1、CYP8B1、CYP7A1的蛋白及mRNA水平下调，CPT1A、CYP27A1、TGR5的蛋白与mRNA水平及CYP7B1的mRNA水平上调。流式细胞术和试剂盒的检测结果显示，与Control组相比，NEFA组中脂滴的含量、TG含量均上调，与NEFA组相比，INT-777+NEFA组中的脂滴含量、TG均下调。结果表明，添加TGR5激动剂后促进TGR5的表达，改善脂肪肝奶牛肝脏中脂质代谢异常及胆汁酸合成异常。

关键词

奶牛 / 脂肪肝 / TGR5 / 脂质代谢 / 胆汁酸合成