基于酵母双杂交系统筛选与鉴定非洲猪瘟病毒M1249L互作因子

崔帅; 王洋; 陈世钰; 蒋亚君; 房立春; 庞忠宝; 郭晓宇; 贾红; 朱鸿飞

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.11.01

中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (11) : 2301 -2308. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.11.01

基于酵母双杂交系统筛选与鉴定非洲猪瘟病毒M1249L互作因子

崔帅, 王洋, 陈世钰, 蒋亚君, 房立春, 庞忠宝, 郭晓宇, 贾红, 朱鸿飞

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摘要

为从宿主细胞角度探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)衣壳蛋白M1249L的功能，本研究以M1249L蛋白为研究对象，构建诱饵质粒(pGBKT7-M1249L),利用原代猪骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs)酵母双杂交cDNA文库，通过回转验证、序列比对，最终筛选获得包括IL-1β、CTSB和DNAJA3在内的20个候选互作蛋白，并进一步通过免疫共沉淀验证。GO和KEGG富集分析显示这些宿主蛋白参与代谢过程、生物调节、细胞通讯及应激反应等生物过程，并涉及Toll样受体信号通路(Toll-like receptor signaling pathway)和NOD样受体信号通路(NOD-like receptor signaling pathway)等多条信号通路。本研究为进一步阐明ASFV M1249L在病毒感染及免疫调控中的作用机制奠定了基础。