表达PRRSV NADC30-like GP3重组腺病毒的构建及小鼠免疫效果评价

李红欢; 王泽轩; 乔彦杰; 李益涛; 刘紫威; 马忠臣; 刘才冬; 崔耀成; 王震; 王月丽; 易继海; 陈创夫

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.11.02

中国兽医学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (11) : 2309 -2317. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2025.11.02

表达PRRSV NADC30-like GP3重组腺病毒的构建及小鼠免疫效果评价

李红欢, 王泽轩, 乔彦杰, 李益涛, 刘紫威, 马忠臣, 刘才冬, 崔耀成, 王震, 王月丽, 易继海, 陈创夫

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摘要

通过体外同源重组构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)NADC30-like GP3重组腺病毒载体疫苗，以探究其小鼠水平的免疫效果评价。以5型腺病毒为载体，制备表达PRRSV GP3蛋白的重组腺病毒，通过荧光观察、PCR和Western blot法对重组腺病毒进行体外鉴定。将重组腺病毒免疫小鼠，采用间接ELISA和ELISpot等方法检测重组腺病毒诱导的体液免疫和细胞免疫反应。经酶切、PCR、荧光和Western blot鉴定，表明重组腺病毒rAdGP3构建和包装成功。免疫小鼠后，能产生特异性抗体和中和抗体，表明重组腺病毒能产生较强的体液免疫。ELISpot和淋巴细胞增殖试验显示重组腺病毒疫苗能刺激机体分泌IFN-γ特异性T淋巴细胞数量和诱导机体淋巴细胞增殖，表明重组腺病毒能增强机体细胞免疫应答水平。本研究成功构建了rAdGP3重组腺病毒，且在小鼠水平上具有良好的免疫原性，为PRRSV新型疫苗的研发提供了参考。