副猪格拉瑟菌RuvB基因缺失株的构建及主要生物学特性

摘要

副猪格拉瑟菌能引发猪Gl?sser’s病，但该菌的致病机制尚不完全明确。RuvB蛋白是AAA+超家族成员之一，副猪格拉瑟菌的RuvB基因对其毒力的影响尚不明确。本研究利用血清13型副猪格拉瑟菌ZJ1208和自杀质粒介导的自然转化方法构建了RuvB基因缺失菌株，并命名为ΔRuvB。通过生长速率、菌落形态和菌体染色、透射电镜观察、渗透压耐受、高温耐受、热休克、紫外抗性、荚膜多糖浓度测定、血清杀菌、小鼠模型毒力试验研究了RuvB基因缺失对ZJ1208菌株生物学特性的影响。结果显示，ΔRuvB的生长速度与亲本菌株无明显差异，透射电镜显示菌体长度明显增加，但ΔRuvB菌体表面OMV数量并未明显增多。此外，ΔRuvB的荚膜多糖形成能力和血清抗性显著下降，对紫外线和高温的耐受性降低，对渗透压和氧化应激的抗性显著降低。小鼠攻毒试验中，ΔRuvB与亲本菌株ZJ1208相比致死率降低20个百分点，表明ΔRuvB毒力有所减弱。结果表明，RuvB基因对副猪格拉瑟菌的环境适应能力有重要影响。

关键词

副猪格拉瑟菌 / RuvB / 紫外抗性 / 荚膜多糖 / 血清抗性