1株猫杯状病毒的分离鉴定及遗传变异分析

摘要

采集疑似猫杯状病毒（feline calicivirus, FCV）感染猫的眼鼻口分泌物，接种CRFK细胞分离得到1株病毒，命名为FCV-HUA,通过PCR、病毒形态学观察、生长动力学试验、全基因组序列测定与同源性分析等对其进行了鉴定。结果显示，FCV-HUA可在CRFK细胞中增殖并产生明显的细胞病变效应（cytopathic effect, CPE）;用FCV特异性引物对分离毒株进行PCR鉴定，可得到674 bp特异性条带；电镜观察到FCV-HUA的病毒粒子特征符合FCV形态结构，直径约为40 nm的球形病毒粒子；测序结果显示，FCV-HUA的VP1基因长度为2 007 bp,基因组全长7 785 bp;全基因组测序同源性分析结果显示，FCV-HUA与参考序列的核苷酸序列相似性在77.6%～85.0%之间，其中与FB-NJ-13毒株核苷酸序列同源性最高，为85.0%,属同一分支；生长动力学试验结果显示，FCV-HUA病毒滴度在24 h达到最高，TCID₅₀为10^-9.9/mL;致病性分析结果显示，用FCV-HUA攻毒后，可使猫出现明显的上呼吸道感染症状。本研究分离鉴定1株FCV,为西安地区猫杯状病毒病的防控提供了参考。

关键词

猫杯状病毒 / 分离鉴定 / VP1 / 遗传变异分析