H9亚型禽流感病毒LMH悬浮培养工艺优化及疫苗的免疫效力评价

摘要

为建立并优化禽流感病毒H9亚型TJ-4株在LMH悬浮细胞中的培养工艺，本研究通过对禽流感病毒TJ-4株接种LMH悬浮细胞的细胞初始密度、培养温度、收获时间、病毒感染复数（MOI）等关键参数进行系统研究，并对LMH悬浮细胞培养的禽流感病毒TJ-4株细胞源疫苗和鸡胚源疫苗进行安全性评价和效力检验。结果表明，在细胞初始密度4.0×10～6 cells/mL、MOI为0.002 50、培养温度为35℃,培养72 h后，血凝效价最高。免疫SPF鸡后，0.5 mL剂量组在接种后28 d的HI抗体平均滴度达到log₂（12.8）,攻毒后免疫组未检测到病毒，保护率为100%,且细胞源与鸡胚源疫苗的抗体水平和保护效果无显著性差异。试验期间免疫鸡只未出现异常反应，疫苗安全性符合标准。结果表明，优化后的工艺参数可稳定生产TJ-4株灭活疫苗，其免疫原性和保护效果可靠，适用于规模化生产。

关键词

LMH悬浮细胞 / 禽流感病毒 / 悬浮培养 / 疫苗评价