猫支原体感染间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

叶子俊; 王枞嵘; 颜权辉; 李尉晖; 叶明俊; 李秋燕; 曹胜波

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.01.10

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (1) : 78 -83. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.01.10

猫支原体感染间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

叶子俊, 王枞嵘, 颜权辉, 李尉晖, 叶明俊, 李秋燕, 曹胜波

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摘要

通过蔗糖密度梯度离心纯化猫支原体（Mycoplasma felis,M.felis）,灭活后作为包被抗原，初步建立M.felis ELISA抗体检测方法。结果显示，该方法最佳抗原包被质量浓度为1 mg/L,2%BSA封闭45 min,血清最佳稀释度1:128,血清最佳孵育时间45 min,二抗最佳稀释度1∶5 000,二抗最佳孵育时间45 min, cut-off值为D₄₅₀值=0.352;特异性试验证实该方法与猫疱疹病毒等其他猫常见病原的抗体无交叉反应；阴阳性血清的组内和组间变异系数均小于7%,具有良好的重复性；用该方法对209份临床样品检测，结果显示该方法与代谢抑制法（metabolic inhibition test, MIT）对比阳性符合率达92.59%。