猴痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立

摘要

根据猴痘病毒（monkeypox virus, MPXV）F3L基因的特异性区域设计特异性引物和探针，建立MPXV的实时荧光PCR方法。结果显示，该方法特异性强，能准确检测MPXV,与天花病毒、痘苗病毒、骆驼痘病毒、牛痘病毒、鼠痘病毒等其他正痘病毒以及山羊痘病毒、结节性皮肤病病毒等羊痘病毒属病毒无交叉反应；敏感性试验结果显示，最低检测限为230拷贝/mL MPXV重组质粒；标准曲线回归方程：y=-3.619x+38.069,R²=0.997,显示出良好的线性关系；重复性试验结果显示，批内和批间变异系数（Cv）均小于4.00%,表明该方法具有较高的稳定性和重复性；模拟样品检测结果显示，本试验建立的荧光PCR方法与《猴痘防控方案》中的荧光PCR法一致性为100%。结果表明，本试验建立的方法可用于MPXV检测，这为MPXV监测和流行病学调查提供了有力的技术支持。

关键词

猴痘病毒 / 荧光PCR / F3L基因