信息素脂蛋白PplA调控单增李斯特菌群体感应

摘要

首先，通过结晶紫染色、BCA蛋白质量浓度测定及最小抑菌浓度（minimal inhibit concentration, MIC）试验分别研究了信息素脂蛋白PplA对生物被膜形成、胞外蛋白含量及耐药性的影响，结果显示PplA对单增李斯特菌生物被膜形成及胞外蛋白含量有抑制作用，与β-内酰胺类抗生素的耐受有关。然后，将单增李斯特菌（Listeria monocytogenes,L.monocytogenes）野生株EGD-e和pplA缺失株在37℃体外培养后进行转录组测序，并利用相关软件以log₂（fold change, FC）绝对值>1为标准筛选差异表达基因，对差异基因进行GO注释及富集分析和KEGG注释及富集分析。最后，利用qRT-PCR对富集到的有关群体感应基因转录组数据的准确性进行验证，结果显示在转录组的测序结果中共筛选出显著差异基因653个，与EGD-e相比，pplA缺失株转录组中存在显著上调基因414个，显著下调基因239个；GO及KEGG分析的结果显示PplA参与L.monocytogenes的多种途径，其中包含群体感应相关基因18个，分别为lmo0135、lmo0136、lmo0137、lmo0152、lmo0539、lmo1295、lmo1527、lmo1529、lmo1803、lmo2192、lmo2193、lmo2194、lmo2195、lmo2196、lmo2434、secY、ffh和lmo2854,并且qRT-PCR检测这18个基因转录水平与转录组中的数据趋势一致。

关键词

单增李斯特菌 / 信息素脂蛋白PplA / 转录组 / 生物被膜 / 群体感应