小反刍兽疫病毒感染对山羊肾细胞糖酵解的影响

摘要

用Western blot分别检测小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus, PPRV)感染山羊肾细胞(LDG-2)12、24、36 h后葡萄糖转运蛋白(glucose transporter, GLUT)、糖酵解相关的己糖激酶(hexokinase, HK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、丙酮酸脱氢酶E1亚基β(pyruvate dehydrogenase E1 subunit beta, PDHβ)、丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)和病毒核衣壳蛋白(PPRV-N)表达水平；用分光光度法分别检测PPRV感染细胞内葡萄糖、乳酸和ATP含量变化；用GLUT1特异性抑制剂BAY-876、2-脱氧葡萄糖(2-DG)和草氨酸钠(sodium oxalate, SO)分别处理PPRV感染细胞，观察抑制GLUT、HK和LDH活性对糖酵解途径和PPRV复制的影响。结果显示，PPRV感染细胞GLUT1、GLUT2、HK1和LDHA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);胞内葡萄糖、乳酸和ATP含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。同时，PDHβ表达水平显著下调(P<0.01),PDK1表达水平显著上调(P<0.01)。经抑制剂BAY-876和SO处理的PPRV感染细胞中乳酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),PPRV-N蛋白表达水平显著下调(P<0.01);而在2-DG处理的PPRV感染细胞中，乳酸含量显著降低(P<0.01),PPRV-N蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结果表明，PPRV感染能显著增强LDG-2细胞葡萄糖摄取和糖酵解，促进病毒复制；用BAY-876、SO抑制葡萄糖转运和糖酵解可显著抑制PPRV在LDG-2细胞的复制，为深入了解PPRV的致病机制及开发针对糖酵解途径的抗病毒药物提供了科学依据。

关键词

小反刍兽疫病毒 / 糖酵解 / 病毒复制 / 山羊