2022—2024年贵州省阿卡斑病毒分子流行病学调查及羊源毒株的分离与鉴定

摘要

为了解贵州省阿卡斑病毒(Akabane virus, AKAV)的分子流行特征，本研究对2022-2024年间贵州7个市(州)122个养殖场共2 510份牛、羊临床样本进行采集，通过荧光定量PCR方法对其进行AKAV检测，阳性样本测定其S片段和部分M片段序列，分别构建系统进化树，解析其在本地区的优势基因型，部分阳性样本利用牛肾细胞(MDBK细胞)进行毒株分离，通过电镜观察、全基因组测序和理化特性分析对分离毒株进行鉴定。结果发现，共有14个养殖场的111份样本为阳性，场点阳性率和个体阳性率分别为11.48%(14/122)和4.42%(111/2 510),规模化养殖场的场点阳性率为21.67%(13/60),显著高于散养户(1.61%,1/62),牛、羊2种动物的阳性率分别为3.65%(73/1999)和7.44%(38/511),季节性统计显示阳性样本均出现在春、夏两季，秋、冬季节均为阴性；测定38份AKAV阳性样本(18份羊源、20份牛源)的S和M片段，系统进化树分析显示其与基因Ⅱ型毒株位于同一分支，遗传进化关系最为接近，均属于基因Ⅱ型毒株；经MDBK细胞传代培养，自山羊抗凝血中成功分离到1株AKAV毒株，病毒粒子球状，有囊膜，直径约100 nm,对酸、热敏感，对碱不敏感，能凝集鹅红细胞，全基因组同源性比对分析显示该毒株与基因Ⅱ型的JaLAB39和TJ2016最为相似(99.8%以上),将其命名为GZTS-1株(中国典型培养物保藏中心保藏编号CCTCC NO:V202458)。本试验首次对贵州省AKAV的分子流行特征进行系统调查与分析，其结果可为AKAV的防控策略提供参考，对疫苗、诊断产品的开发以及致病机制的深入研究奠定基础。

关键词

阿卡斑病毒 / 分子流行病学 / 贵州省 / 分离 / 鉴定