沙门菌RPA-LFD快速检测方法的建立与应用

廖怡雯; 叶景芬; 武绍碧; 杨婉; 罗雪; 吴文飞; 杨琦

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.02.13

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (2) : 338 -343. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.02.13

沙门菌RPA-LFD快速检测方法的建立与应用

廖怡雯, 叶景芬, 武绍碧, 杨婉, 罗雪, 吴文飞, 杨琦

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摘要

将重组酶聚合扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)技术与胶体金侧向流试纸条技术(lateral flow dipstick, LFD)结合，建立一种快速、高特异性和高灵敏度的沙门菌检测方法。以沙门菌ttrRSBCA基因为靶标，通过引物设计、反应条件优化来建立Salmonella-RPA-LFD检测方法，评估其特异性、灵敏度等性能，并对17份鸡泄殖腔拭子进行验证。结果显示：Salmonella-RPA-LFD方法在35℃20 min内即可完成检测；与大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等7种常见病原菌没有交叉反应，且能检测出不同血清型的沙门菌；其灵敏度可达10～0拷贝/μL,RPA-LFD阳性率与国家标准文件方法的结果一致。结果表明，建立的Salmonella-RPA-LFD方法特异性强、灵敏度高，可快速、准确地检测沙门菌。