猪流行性腹泻病毒对人小肠上皮细胞的易感性及蛋白质组学分析

摘要

为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)-LJX毒株对人小肠上皮细胞(FHs 74 Int)的易感性，本研究以FHs 74 Int细胞为模型，首先通过RT-qPCR和Western blot检测PEDV-LJX感染后对常见人冠状病毒受体ACE2、APN、DPP4表达的影响及抗体阻断法确定阻断ACE2、APN、DPP4和唾液酸后对PEDV复制的影响，同时结合蛋白组学分析并验证ROCK2对PEDV复制的影响。结果显示，PEDV-LJX感染FHs 74 Int后，对ACE2、APN、DPP4基因及蛋白表达无显著影响；抗体阻断ACE2、APN、DPP4后PEDV N基因拷贝数无显著变化，但是唾液酸酶预处理后，PEDV N基因拷贝数显著升高。感染PEDV-LJX后ROCK2基因和蛋白水平表达量显著升高，与蛋白组学结果一致；干扰ROCK2后PEDV N基因拷贝数及蛋白表达量显著降低。结果表明，ACE2、DPP4、APN及唾液酸并非PEDV-LJX感染FHs 74 Int细胞的受体，唾液酸可以抑制PEDV复制，ROCK2可以促进PEDV复制。

关键词

猪流行性腹泻病毒 / 人小肠上皮细胞 / ROCK2