内蒙古地区捻转血矛线虫多重耐药分离株细胞色素P450基因表达分析

摘要

为探究细胞色素P450酶系（CYPs）基因与捻转血矛线虫多重耐药性之间的关系。首先通过幼虫发育抑制试验，评估了5株捻转血矛线虫对阿苯达唑（ALB）、伊维菌素（IVM）和左旋咪唑（LEV）的耐药性。随后，将这些虫株的第3期幼虫（L3）各分为7组，包括1个对照组和6个试验组，试验组分别用3种药物的高、低浓度处理。在27℃条件下孵育0、12、24 h后，用生理盐水溶液漂洗L3幼虫，并将其保存于-80℃。之后利用TRIzol试剂提取总RNA,进行反转录和实时荧光定量PCR,分析HCOI01928800a、HCOI01928800b、HCOI100383700、HCOI100383400和HCOI01579500基因的表达水平。结果表明，在幼虫发育抑制试验中，Hc-S株对ALB、LEV和IVM均无耐药性。其他4株捻转血矛线虫的EC₅₀值较Hc-S株显著提高。在荧光定量PCR试验中，高度耐药与中度耐药虫株相较于敏感虫株，HCOI100383400基因表达水平显著上调，而HCOI01579500基因在所有耐药虫株中表达水平显著下调。此外，这5种CYPs基因表达水平被药物诱导的变化不显著。说明HCOI100383400和HCOI01579500基因表达的变化可能是虫体长期接触驱虫剂的结果，且虫体多重耐药性可能与HCOI100383400基因相关。

关键词

捻转血矛线虫 / 多重耐药性 / 细胞色素P450 / 荧光定量PCR