BKV流行株的遗传变异分析及双抗体夹心BA-ELISA方法的建立

摘要

旨在探究我国东北地区牛库布病毒(bovine kobuvirus, BKV)的基因组遗传变异特征并建立灵敏性更高的快速检测方法。应用RT-PCR对收集自黑龙江、吉林、辽宁和内蒙古4个省份的324份腹泻牛粪便样进行了BKV检测，结果显示，BKV阳性率为39.8%。将病料中的BKV基因组分段扩增并测序，获得2株BKV完整序列，分别命名为BKV/NMG/2024和BKV/HLJ/2024,并对东北地区BKV流行毒株的遗传变异及流行情况进行分析。经分析，BKV/HLJ/2024和BKV/NMG/2024亲缘关系较近，可能由同一毒株演化而来。在传统双抗体夹心ELISA方法的基础上，引入生物素和SA-HRP,建立检测BKV的信号放大型双抗体夹心ELISA(双抗体夹心BA-ELISA)方法，该方法具有良好的特异性、重复性和敏感性，较传统ELISA灵敏度提高了3倍，为BKV隐性感染和早期感染的诊断提供了可靠的技术手段。

关键词

单克隆抗体 / BKV / 遗传进化分析 / ELISA / 信号放大