检测牛冠状病毒信号放大型胶体金免疫层析试纸条方法的建立

摘要

基于酶信号放大系统研制了检测牛冠状病毒(bovine coronavirus, BCoV)的信号放大型胶体金免疫层析试纸条。以兔源BCoV多克隆抗体为捕获抗体，HRP标记的鼠源BCoV单克隆抗体1C5为检测抗体。优化后稳定胶体金溶液所需酶标抗体的最适质量浓度为74.24 mg/L,最佳标记pH值为8.5。质控线包被山羊抗鼠IgG抗体质量浓度为1.0 g/L,检测线包被的多抗质量浓度为5.46 g/L。利用研制的信号放大型胶体金免疫层析试纸条对BCoV进行测试，其最低检出量约为4.1×10～2 copies/μL,与传统胶体金试纸条相比，检测灵敏度提高10倍，且具备良好的特异性、重复性和稳定性。对298份临床病料进行检测，结果显示BCoV阳性检出率为4.70%,与RT-PCR方法的阳性符合率为87.50%,总符合率为99.30%。综上，本研究应用酶信号放大系统对胶体金试纸条检测信号进行放大，建立了一种操作简便、快速高效且灵敏度高的检测BCoV信号放大型胶体金免疫层析试纸条方法。

关键词

牛冠状病毒 / 信号放大 / 胶体金免疫层析试纸条