兔出血症病毒2型变异株的分离鉴定及其致病性分析

摘要

兔出血症病毒2型(rabbit hemorrhagic disease virus type 2,RHDV2)感染严重危害我国养兔业发展，然而目前关于山东省流行毒株的分子特征及致病性尚不十分明确。本研究对山东省一些规模化兔场疑似RHDV2感染病例进行病原分离鉴定和动物感染回归试验。对分离的RHDV2毒株的VP60基因(1 740 bp)进行RT-PCR扩增、测序及同源性比较分析，发现该毒株与2011年首次报道的RHDV2法国株同源性为94.5%,与国内江苏毒株和四川毒株同源性均为98.4%,与2021年报道的山东株同源性为97.9%,将该毒株命名为RHDV2-SDBZ2404。将该毒株感染45日龄幼兔，发现6只试验兔在感染后72 h内全部死亡，体温在12 h内升高至40.8℃左右，且高温状态持续至死亡。发病期间，试验兔表现出典型临床症状，主要包括水料废绝、抽搐尖叫、口鼻流血、角弓反张等。对病死兔进行剖检观察，可见其主要脏器出现明显病理损伤：肝脏显著肿大、质地脆弱，表面散布带状或片状出血灶；肺脏发生严重水肿，肺组织弥漫性出血；脾脏肿大明显，局部区域可见梗死灶。病理组织学检查结果显示，肝细胞坏死、组织结构紊乱，肺泡腔及间质出血、淤血，肾小球弥散性血管内凝血。RT-qPCR检测发现，试验兔感染毒株后1 d,血液中病毒载量已处于较高水平，且随感染时间延长病毒载量持续增加；死亡前后组织中病毒载量由高到低依次为肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、十二指肠，提示肝脏、脾脏是该毒株的主要靶器官。本研究明确了山东省RHDV2主要流行毒株的分子遗传特性和临床致病特点，为临床诊断和防控提供了科学依据。

关键词

兔出血症2型病毒 / VP60基因 / 兔 / 分离鉴定 / 致病性