猪伪狂犬病病毒TJ-ΔgE/gI-mRuby报告毒株的构建及其在叶绿素铜钠抗病毒研究中的应用

摘要

猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus, PRV)是一种对全球养猪业构成重大威胁的主要病原体，由于其可引起仔猪致命的中枢神经系统紊乱、育肥猪呼吸道症状及妊娠母猪流产，进而导致巨大的经济损失。目前，Bartha-K61疫苗被广泛用于猪伪狂犬病(porcine pseudorabies, PR)的防控；然而，PRV变异株的出现降低了该疫苗的免疫保护效力，迫切需要研发和实施更为有效的控制措施。本研究利用基于同源重组修复的CRISPR/Cas9技术，将mRuby荧光蛋白替换PRV的gI和gE基因，成功构建了PRV TJ-ΔgE/gI-mRuby报告毒株。该毒株展现出与亲本病毒相似的高效复制能力，在PK-15细胞中经过多次传代后仍保持遗传稳定性。基于PRV TJ-ΔgE/gI-mRuby报告毒株优良的复制特性和遗传稳定性，本研究将其应用于抗病毒药物筛选，首次证实叶绿素铜钠(sodium copper chlorophyllin, SCC)在体外具有显著的抗PRV活性。进一步研究发现SCC不仅可以直接灭活病毒，还可抑制病毒感染后过程，提示SCC可作为研发PRV预防及治疗药物的先导化合物。

关键词

猪伪狂犬病毒 / CRISPR/Cas9 / 报告病毒 / 叶绿素铜钠