鸭源铜绿假单胞菌的分离鉴定及其对实验鸭的组织病理学观察

摘要

为明确福建某种鸭场送检病死鸭的病因，本研究采集病死鸭肝脏、脾脏分离细菌，随后对分离菌形态染色镜检、生化试验及16S rRNA PCR扩增、序列分析等鉴定，并对鉴定的分离菌做毒力因子检测、药敏试验、动物致病性试验及组织病理学观察。结果表明，从肝脏和脾脏中分离到1株革兰阴性杆菌，命名为DH25株。该分离菌D2Mini细菌系统的生化鉴定结果为铜绿假单胞菌，16S rRNA系统发育树与铜绿假单胞菌参考菌株同处一个进化小分支，同源性为98.38%～100.00%。毒力因子检测发现分离菌同时携带17个毒力基因，包括完整的T3SS效应蛋白(exoS/exoT/exoY/exoU)及生物被膜相关因子(pilF/pilM)。致病性试验显示，分离菌对雏鸭具有较强的致病性，并对多组织器官造成不同程度的病理损伤。病理切片观察可见雏鸭肝脏充血、出血，弥漫性脂肪变性；脾窦扩张、水肿，脾索排列紊乱、点状坏死；肺脏充血，肺房扩张；肾球囊扩张、有蛋白管型；心肌充血、出血；十二指肠肠绒毛坏死、脱落，有浆细胞和淋巴细胞浸润。药敏试验表明，该分离菌对阿米卡星、环丙沙星和阿奇霉素等12种抗生素敏感，对头孢西叮、氨苄西林和强力霉素等15种抗生素耐药。综上，本研究成功分离并鉴定出1株具有强致病性和多重耐药性的鸭源铜绿假单胞菌，并导致雏鸭多器官特征性病理损伤，研究结果为鸭铜绿假单胞菌病的临床诊断和防控提供了参考。

关键词

铜绿假单胞菌 / 鸭 / 细菌鉴定 / 毒力基因 / 耐药性 / 致病性