1株猫源鹦鹉热衣原体的分离与鉴定

摘要

为了解猫源鹦鹉热衣原体（Chlamydia felis,C.felis）在宠物猫中的流行情况及潜在的公共卫生风险，本研究对1只疑似患有上呼吸道感染（upper respiratory tract disease, URTD）的病死猫脏器进行相关病原检测。将处理后的样品利用SPF鸡胚进行分离培养，通过吉姆萨染色、透射电镜观察等方法对分离株进行鉴定。结果表明，病死猫的肺脏检出衣原体特异性核酸。样品研磨液接种SPF鸡胚后，病死鸡胚的胚体出现衣原体样典型病变。使用鹦鹉热衣原体国标ompA鉴定引物可扩增出阳性条带。鸡胚半数致死量(median egg lethal dose, ELD₅₀)试验表明，该分离株第4代的滴度为1.9×10⁵ ELD₅₀/0.1 mL;通过Giemsa染色可在病死鸡胚卵黄囊膜中观察到圆形或椭圆形的包涵体，电镜下可观察到原体（elementary body, EB）和网状体（rticulate body, RB）的典型结构。对该分离株ompA基因的核苷酸序列进行遗传进化树分析，发现与猫衣原体Fe/C-56株在同一分支并且与鹦鹉热衣原体6BC亲缘性最近。综上，研究分离到1株C.felis,并命名为C.felis-SH 23。该研究为后续C.felis的致病力检测和疫苗研发提供了生物材料支持。

关键词

猫源鹦鹉热衣原体 / 分离鉴定 / ompA基因