SYVN1促进过氧化氢诱导的奶牛脂肪细胞氧化应激和炎症反应

摘要

旨在通过体内外试验分析滑膜细胞凋亡抑制物1（synovial apoptosis inhibitor 1,SYVN1）在过氧化氢（H₂O₂）诱导的奶牛脂肪细胞氧化应激和炎症中的调控作用及其机制。采集健康和临床酮病奶牛脂肪组织，检测脂肪组织SYVN1表达水平、氧化应激和炎性反应状态。体外分离培养奶牛原代脂肪细胞，诱导分化成熟后，使用不同浓度的H₂O₂进行刺激，观察SYVN1蛋白表达变化。此外，用SYVN1小干扰RNA（si-SYVN1）转染脂肪细胞48 h,随后用H₂O₂刺激2 h。通过生化试剂盒检测丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）水平和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，Western blot检测SYVN1、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）、核因子κB（NF-κB）和磷酸化NF-κB（p-NF-κB）蛋白表达变化，qRT-PCR检测SYVN1、促炎因子肿瘤坏死因子-α（TNFA）和白细胞介素-1β（IL-1β）基因表达变化。结果显示，与健康奶牛相比，临床酮病奶牛脂肪组织SYVN1的表达水平显著升高，并伴随着GSH-Px活性和T-AOC水平的显著下降以及MDA含量的显著上升。同时，临床酮病奶牛脂肪组织p-NF-κB水平及TNF-α和IL-1β基因表达上调，IκBα的表达下调。体外试验结果显示，不同浓度的H₂O₂刺激能依赖性地上调SYVN1蛋白表达。沉默SYVN1能够显著逆转高浓度H₂O₂诱导的脂肪细胞氧化应激和炎症反应，表现为MDA含量下降，T-AOC水平和GSH-Px活性升高，p-NF-κB表达下降，IκBα表达上调，以及炎性因子TNF-α和IL-1β的基因表达减少。综上，SYVN1能够促进H₂O₂引起的奶牛脂肪细胞氧化应激和炎症。

关键词

脂肪细胞 / SYVN1 / 氧化应激 / 炎症反应 / 奶牛