犬副流感病毒单克隆抗体的研制及胶体金检测试纸条的质量评价

摘要

利用纯化的犬副流感病毒（canine parainfluenza virus, CPIV）肌肉注射及腹腔冲击免疫，通过ELISA方法和间接免疫荧光双筛选，成功筛选3株杂交瘤细胞，分别命名为1B12、5F3和4E3,其中1B12和5F3靶标抗原为CPIV N蛋白、4E3靶标抗原为CPIV F蛋白，3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体敏感性、特异性良好，单抗亚类1B12、5F3为IgG1,4E3为IgG2a。4E3作为金标抗体，1B12作为检测抗体，羊抗鼠IgG作为质控线抗体，制备CPIV胶体金检测试纸条，敏感性检测限约为10^1.67TCID₅₀/mL,与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒2型等无交叉反应，特异性良好，与PCR方法的符合率达97.8%。结果表明，本试验建立的胶体金试纸条检测方法敏感性高、特异性强，适用于CPIV的临床快速的初筛检测。

关键词

S852犬副流感病毒 / H蛋白 / F蛋白 / 单克隆抗体 / 胶体金试纸条

基金资助

国家自然科学基金资助项目(32272974)