1株血清8b型禽腺病毒的分离鉴定及致病性分析

摘要

应用鸡胚卵黄囊接种方法从河北省邯郸地区发病鸡群中分离到1株血清8b型FAdV（serum type 8b avian adenovirus, FAdV-8b）HD2402株，并对其进行了鉴定和SPF鸡致病性研究。结果显示，PCR检测阳性的样品进行连续3次卵黄囊接种，获得了纯化病毒，其EID₅₀为10^-3.319/0.2 mL;对分离株HD2402株的全基因组测序和Hexon、Penton、Fiber 3个结构基因进行同源性分析发现，该3个结构基因序列与GenBank血清8b型FAdV分离株的核苷酸同源性分别为93.7%～100%、98.3%～99.6%和92.5%～99.9%,与血清8b型FAdV处于同一分支且亲缘关系最近，确认分离株HD2402株为血清8b型FAdV;将纯化的HD2402株鸡胚毒进行1日龄SPF鸡的致病性研究，每只鸡胸部肌肉注射10^-3.319/0.2 mL,攻毒后第3天可观察到鸡排黄绿色稀粪，在第4天出现死亡并持续至攻毒后第7天，病死率高达100%;病理剖检可见死亡鸡具有典型的肝炎-心包积液综合征（hepatitis-hydropericardium syndrome, HHS）和包涵体肝炎（inclusion body hepatitis, IBH）症状并伴随肾脏肿大和出血症状；组织病理学检测观察到肝脏有包涵体存在，心脏和肾脏有不同程度的炎性反应；用荧光定量PCR方法对攻毒后鸡的组织进行病毒载量和咽肛拭子排毒检测显示，在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌胃、腺胃、胸腺、法氏囊均检测到病毒，其中肝脏的病毒载量高于其他器官，表明该毒株具有广泛的组织嗜性；在攻毒后第1～7天均可在咽肛拭子在检测到病毒。本研究为血清8b型FAdV的遗传变异情况和SPF鸡致病性情况提供了宝贵的临床数据。

关键词

禽腺病毒 / 分离鉴定 / 遗传进化 / 生物学特性

基金资助

河南省揭榜挂帅科技资助项目(211110111000); 国家自然科学基金资助项目(3210190339); 江西省科学院重点研发计划重点资助项目(2022YSBG21006)