猫疱疹病毒1型、猫细小病毒和猫博卡病毒三重PCR检测方法的建立

李彬; 谷思睿; 曹丽艳; 金小赢; 李凯

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.09

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (6) : 1261 -1266. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.09

猫疱疹病毒1型、猫细小病毒和猫博卡病毒三重PCR检测方法的建立

李彬, 谷思睿, 曹丽艳, 金小赢, 李凯

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摘要

针对猫疱疹病毒1型(feline herpesvirus type 1,FHV-1)、猫细小病毒(feline parvovirus, FPV)和猫博卡病毒(feline bocavirus, FBoV)的保守序列分别设计了3对特异性引物，建立了检测FHV-1、FPV和FBoV的三重PCR方法，并优化了反应条件与评估了检测方法的特异性、敏感性和重复性；同时，以此方法检测了临床样本。结果显示，该方法在同一PCR体系中使用相同反应条件可以扩增出3条目的条带即FHV-1 (757 bp)、FPV (1 092 bp)和FBoV(465 bp),而扩增猫杯状病毒、冠状病毒和星状病毒等，无非特异性条带出现；构建的FHV-1、FPV、FBoV阳性标准质粒的最低检测拷贝数分别达到1×10～2、1×10～4、1×10～3拷贝/μL;批间重复性和批内重复性良好。使用该方法与单重PCR对53份临床样品的检测结果显示，两者的检测结果一致。综上，本研究成功建立了一种能同时对FHV-1、FPV和FBoV进行快速检测的三重PCR方法，且敏感性良好，特异性高，可用于临床猫传染病的鉴别诊断，也为FHV-1、FPV和FBoV的流行病学调查提供技术支持。