1株特异性裂解多重耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的生物学与基因组特性

摘要

以肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kpn)标准菌株ATCC700603为宿主菌，采用双层平板法分离噬菌体，透射电镜观察形态，测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(multiplicity of infection, MOI)、一步生长曲线及环境稳定性，并进行基因组测序分析。结果显示，成功分离到1株Kpn噬菌体，命名为vB＿KpnS＿A14,其噬菌斑为直径(0.3±0.1) nm的无晕环透明圆斑，透射电镜下为有尾噬菌体，头部直径(90±10) nm,尾部长度(60±10) nm;可裂解多重耐药菌株，耐碳青霉烯类Kpn裂解率为97.6%,产超广谱β-内酰胺酶Kpn裂解率为73.9%;MOI为0.1,潜伏期约为5 min,裂解量为600 PFU/cell,在pH4～10、4～50℃条件下活性较稳定，对乙醇和紫外线较为敏感；基因组分析显示其为线性双链DNA,全长174 662 bp, GC含量41.9%,有274个ORF,不含毒力基因、溶原基因与耐药基因。结果表明，Kpn噬菌体vB＿KpnS＿A14是1株能够特异性裂解多重耐药Kpn的烈性的Straboviridae科Slopekvirus属噬菌体，具有较强的环境稳定性与安全性，应用潜力较大。

关键词

噬菌体 / 多重耐药肺炎克雷伯菌 / 生物学特性 / 基因组

基金资助

云南省大理白族自治州科技计划资助项目(20232901A020015)