Ⅰ型和Ⅱ型登革病毒重组亚单位候选疫苗的构建及免疫原性分析

陈士刚; 于宁; 张明珠; 张赫; 鲁会军

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.14

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (6) : 1296 -1302. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.14

Ⅰ型和Ⅱ型登革病毒重组亚单位候选疫苗的构建及免疫原性分析

陈士刚, 于宁, 张明珠, 张赫, 鲁会军

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摘要

将Ⅰ型和Ⅱ型登革病毒ED Ⅲ基因进行串联，构建至真核表达载体pCAGGS中，利用哺乳动物细胞Expi293表达系统表达并纯化出DENV-Ⅰ+ⅡED Ⅲ（简写为D1D2ED Ⅲ）重组蛋白；选用4个剂量（2.5、5.0、10.0、20.0μg）的重组蛋白联合铝盐佐剂免疫小鼠，通过ELISA和流式细胞术检测该重组蛋白诱导的体液免疫应答和细胞免疫应答水平；采用病毒微量中和试验方法测定免疫后小鼠血清对DENV-Ⅰ和DENV-Ⅱ的中和抗体滴度。结果显示，4个不同免疫剂量组在加强免疫后均诱发了高水平的IgG抗体，2.5μg组产生效价最低，5.0～20.0μg剂量组的抗体水平未见显著差异；与另外3个剂量组相比，20μg剂量组小鼠的CD4⁺T细胞比例显著升高，各组中CD8⁺T细胞比例相对较低，无显著差异；中和试验结果显示，20μg剂量组诱导的针对DENV-Ⅰ和DENV-Ⅱ的中和抗体效价最高，分别为1.0∶89.6和1.0∶76.8。结果表明，20μg D1D2ED Ⅲ重组蛋白可诱导高水平的体液免疫反应，诱导的抗体可同时中和DENV-Ⅰ和DENV-Ⅱ2种血清型病毒，说明D1D2ED Ⅲ重组蛋白有希望成为一种能同时预防DENV-Ⅰ和DENV-Ⅱ的有效二价亚单位疫苗。