细粒棘球蚴外泌体来源SQOR的原核表达及其亚细胞定位

吕婷婷; 张译丹; 陈潘; 张葭慧; 郭嘉; 张辉

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.18

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (6) : 1330 -1338. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.06.18

细粒棘球蚴外泌体来源SQOR的原核表达及其亚细胞定位

吕婷婷, 张译丹, 陈潘, 张葭慧, 郭嘉, 张辉

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摘要

首先通过生物信息学方法分析硫醌氧化还原酶(sulfide quinoneoxidoreductase, SQOR)的序列特征与功能域，并构建其三维结构模型；构建原核表达载体pET-32a-EGR＿07080,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株中，使用SDS-PAGE和Western blot方法检测SQOR的表达水平，并利用镍柱亲和层析纯化获得高纯度蛋白；进一步构建pDsRed2-C1-EGR＿07080红色荧光真核表达载体，转染至RAW264.7细胞，利用激光共聚焦显微镜观察其表达与分布。结果显示，SQOR含有核定位信号(nuclear localization signal, NLS);成功表达并纯化SQOR(89.7 kDa);成功构建pDsRed2-C1-EGR＿07080真核表达载体；SQOR红色荧光与细胞核蓝色荧光通道的Pearson相关系数(0.88)显著高于SQOR红色荧光与线粒体绿色荧光通道(0.43),说明该蛋白在RAW264.7细胞中主要定位于细胞核，少量分布于线粒体。结果表明，本试验实现了细粒棘球蚴外泌体来源SQOR的表达，并初步明确其核定位特征，为深入探究该蛋白在外泌体介导的致病机制中的作用奠定了基础。