筛选拮抗猪流行性腹泻病毒药物的Cell-ELISA方法建立及应用

蔡林; 钱炳旭; 范宝超; 李彬; 牛家强

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.07.04

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (7) : 1475 -1481. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.07.04

筛选拮抗猪流行性腹泻病毒药物的Cell-ELISA方法建立及应用

蔡林, 钱炳旭, 范宝超, 李彬, 牛家强

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摘要

为构建针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高通量抗病毒药物筛选平台，本研究以PEDV感染的Vero细胞作为固相抗原，利用抗PEDV核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体作为检测抗体，通过系统优化病毒感染时间、抗体稀释度、孵育时间及显色反应条件，建立了专用于抗PEDV药物筛选的灵敏、稳定细胞酶联免疫吸附测定法(Cell-ELISA)。该方法适用于快速、精准评估大规模化合物库的抗病毒活性。应用该平台对640种天然产物进行初步筛选，经多轮药效与毒性验证，最终获得4种具有低细胞毒性的抗病毒候选化合物。进一步通过qRT-PCR、间接免疫荧光(IFA)及Western blot分析证实，上述化合物能够在转录与翻译水平显著抑制PEDV在细胞内的复制。本研究为抗PEDV药物的快速发现提供了可靠的技术平台，并为猪流行性腹泻(PED)的防控策略储备了潜在的先导化合物。