细粒棘球绦虫EGr＿08855基因编码蛋白的定位及不同发育阶段转录水平分析

摘要

旨在分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)EGr＿08855基因在不同发育阶段的转录水平，确定其编码蛋白的免疫原性与组织定位，以评估其作为疫苗候选靶点的潜力。利用qRT-PCR检测EGr＿08855基因在原头蚴、包囊壁及成虫阶段的相对表达量。通过原核表达系统制备重组EGr＿08855蛋白，采用Western blot分析其与感染犬血清的反应性(免疫原性)。利用该蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体，通过间接免疫荧光技术(IFA)确定其在虫体上的亚细胞定位。qRT-PCR结果显示，EGr＿08855基因在成虫阶段(体外培养成虫及犬小肠成虫)的转录水平极显著高于原头蚴阶段(P<0.000 1),表现出明确的阶段特异性高表达。Western blot试验证实，重组EGr＿08855蛋白可被细粒棘球绦虫感染犬的阳性血清特异性识别，表明其具有良好的天然免疫原性。IFA定位结果显示，该蛋白特异性定位于原头蚴和成虫的头钩部位。EGr＿08855是一个在细粒棘球绦虫成虫期高表达、并定位于关键附着器官(头钩)的免疫原性蛋白。EGr＿08855蛋白可能在虫体侵入和固着于终末宿主肠壁的过程中发挥重要作用，具有作为阻断传播的终末宿主疫苗候选抗原的研发价值。

关键词

细粒棘球绦虫 / EGr＿08855基因 / 阶段特异性表达 / 免疫定位

基金资助

新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2022D01A279)