SOCE对高NEFA血症奶牛巨噬细胞极化的影响

摘要

旨在探究钙池操控性钙内流(store-operated Ca²⁺ entry, SOCE)对高非酯化脂肪酸（non-esterified fatty acids, NEFA）血症奶牛巨噬细胞极化的影响。分别采集健康与高NEFA血症奶牛的外周血并分离单核细胞，经7 d体外诱导培养为巨噬细胞。另采用奶牛巨噬细胞系，通过添加1.2 mmol/L NEFA模拟高NEFA血症状态，并分别加入SOCE激活剂TG和抑制剂2-APB进行处理。通过荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光技术检测SOCE关键分子（ORAI1、STIM1）、巨噬细胞极化标志物（iNOS、Arg1）及促炎细胞因子（IL-1β、IL-6）的表达，并分析NFκB信号通路的活化状态。结果显示，与健康奶牛相比，高NEFA血症奶牛巨噬细胞ORAI1、STIM1的mRNA和蛋白水平升高，同时，NFκB信号通路被显著激活，表现为p-NFκB与总NFκB的比值显著升高；iNOS的mRNA和蛋白水平升高；Arg1的mRNA和蛋白水平降低，IL-1β、IL-6炎症因子的mRNA水平升高。在体外试验中，与NEFA组相比，NEFA+TG组进一步增强了SOCE相关分子表达和M1型极化；而NEFA+2-APB组则显著逆转NEFA的促炎效应，促进巨噬细胞向M2型转化。结果表明，SOCE参与调控高NEFA血症下奶牛巨噬细胞极化过程，激活SOCE促进M1型炎症极化，抑制SOCE则推动M2型抗炎极化。

关键词

奶牛 / 高NEFA血症 / SOCE / 巨噬细胞 / 极化

基金资助

龙江科技英才春雁支持计划青年英才资助项目(YQN24048); 国家自然科学基金资助项目(32473111)