呼吸道合胞病毒G蛋白和F蛋白假病毒的制备与鉴定

杨诗寒; 陈竞; 李菊; 崔春梅; 李乐天; 李昌

doi:10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.08.16

中国兽医学报 ›› 2026, Vol. 46 ›› Issue (8) : 1843 -1849. DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2026.08.16

呼吸道合胞病毒G蛋白和F蛋白假病毒的制备与鉴定

杨诗寒, 陈竞, 李菊, 崔春梅, 李乐天, 李昌

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摘要

制备一种基于第3代慢病毒载体、单独或组合包含呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV) G蛋白和F蛋白的3种不同类型的假病毒，并鉴定其在易感细胞Hep2中的感染效果。通过RSV G蛋白和F蛋白基因序列设计特异性引物，通过PCR扩增获得G蛋白和F蛋白目的基因片段，亚克隆至pcDNA3.1(+)载体中获得含有目的基因的重组质粒，与载体质粒plenti-CMV-LUC2和包装质粒pCMV-dR8.2-dvpr共转染HEK-293T细胞，Western blot检测目的蛋白表达，并收集上清，通过感染易感细胞Hep2,测定荧光素酶活性，确定假病毒是否构建成功。结果显示，成功包装出具有高荧光素酶活性的单独或组合含有RSV G蛋白和F蛋白的3种RSV假病毒。结果表明，成功建立了一种RSV假病毒包装方案并制备了假病毒，该假病毒为RSV中和抗体研究、疫苗效力评价和抗病毒药物高通量筛选提供了理想工具。