PEDV N蛋白对Ⅰ型干扰素介导的JAK/STAT信号通路的影响

摘要

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是一种引起仔猪腹泻，且高致死率的冠状病毒。PEDV感染后，通过抑制宿主细胞Ⅰ型干扰素(interferon type I,IFN-Ⅰ)信号通路，逃避宿主先天免疫应答。本研究通过构建PEDV N蛋白表达质粒过表达PEDV N蛋白，并利用qRT-PCR等试验技术检测PEDV N蛋白对宿主抗病毒因子基因转录水平、JAK/STAT信号通路蛋白表达及JAK1、TYK2、STAT1、STAT2磷酸化水平的影响，随后通过免疫共沉淀(Co-IP)和间接免疫荧光(IFA)检测PEDV N蛋白与STAT1、STAT2的相互作用及其对STAT1、STAT2核易位的影响，最后采用Western blot检测STAT1、STAT2对PEDV复制的影响，探索PEDV N蛋白对IFN-Ⅰ介导的JAK/STAT信号通路的调控机制。结果显示，PEDV N蛋白以剂量依赖性方式抑制STAT1、OAS1、ISG56、ISG15、MX2、ZC3HAV1的转录水平，但对JAK/STAT信号通路蛋白及JAK1、TYK2、STAT1、STAT2磷酸化表达水平没有明显抑制作用。Co-IP和IFA试验结果表明，PEDV N蛋白与STAT1和STAT2存在潜在相互作用，并抑制STAT1核易位。Western blot试验结果发现，STAT1和STAT2对PEDV的复制均无显著影响。综上所述，PEDV N与STAT1、STAT2相互作用，抑制STAT1核易位，进而拮抗IFN-β诱导的JAK-STAT信号通路激活，最终发挥免疫抑制作用。这些发现为阐明PEDV N蛋白在病毒免疫逃逸中的作用机制奠定了基础，并为PEDV疫苗和抗病毒制剂的开发提供了潜在靶点。

关键词

猪流行性腹泻病毒 / N蛋白 / Ⅰ型干扰素 / JAK/STAT信号通路 / 核易位

基金资助

国家自然科学基金资助项目(32373029); 河南省高校科技创新人才支持计划资助项目(24HASTIT057)